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液相色譜柱壓升高原因及解決方法

更新時間:2017-04-24點擊次數:4390

色譜柱是液相色譜的心臟,在液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲

透性,延長柱子的使用壽命非常重要。色譜柱壓升高一般是由于柱床內產生了雜質,造成流

體阻力加大所致。這兩個原因,大致又可以分為以下幾方面:

1、流動相的前處理

雜質堵塞色譜柱進口濾片,導致壓力升高。這是由于流動相可能沒有過濾,或過

濾不*,使固體雜質滯留于濾板上所致。

2、樣品的沉淀

當溶解樣品的溶劑與流動相不一致時,樣品進入色譜柱時,可能因溶解度降低而沉淀出來,

造成壓力升高。

3、晶體的析出

使用含有緩沖液的流動相時,緩沖液中的無機鹽可能會殘留在體系之中,它們會因在新流動

相中的溶解度降低而析出,造成流體阻力加大、壓力升高。

4、細菌或霉菌孳生

霉菌在流動相中、管路中或柱子進口處繁殖、生長堵塞濾板,導致壓力升高。所以在使用磷

酸鹽緩沖液時一般要現配現用。

5、溶質吸附

當溶質在柱子上有較強的吸附,且所用的流動相難以將它們洗脫時,累積的未洗脫溶質也會

造成阻力增大和壓力升高。

6、流動相更換過度較快

當改變流動相體系時,不*的更換使不同性質、互不混溶的流動相存在于同一個體系之中,

也會造成壓力升高。

7、壓力脈沖

運行過程中,有時會產生系統內壓力的突然升降。如此所形成的壓力脈沖會造成多孔填料的

崩壞和柱床結構的微小變化,填料微屑的長期積累也可能會使柱床阻力增大,造成壓力升高。

 處理對于緩沖液鹽分如(乙酸銨等)沉積于柱內的情況先用40~50℃的純水,低速正向沖洗柱子,待柱壓逐漸下降后,相應提高流速沖洗,柱壓大幅度下降后,用常溫純水沖洗,之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘;

對于樣品污染沉積的情況,由樣品的沉積引起污染的C18柱,和純水反向沖洗柱子,然后換成甲醇沖洗,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定),再用換成甲醇沖洗,然后用純水沖洗,zui后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。

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