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常規組織樣本核酸(DNA/RNA)提取純化

更新時間:2015-06-30點擊次數:1442



QIAamp DNA Kits 
—— 純化基因組 DNA、線粒體 DNA、細菌、寄生蟲或病毒DNA

  1. 20 分鐘內快速純化高品質,高產量,即用型 DNA(見圖 20)
  2. 多種規格可選擇:Mini Kit 可處理 25 mg 組織,Micro Kit 可處理小于 10 mg 組織
  3. *去除污染物和抑制劑
  4. 可在 QIAcube 上進行自動化純化

表1 QIAamp DNA Mini Kit純化各類樣本的核酸產量

樣品

用量

總核酸的量(μg)*

DNA 的量(μg)?

血液

200 μl

4–12

4–12

白膜層

200 μl

25–50

25–50

細胞

106

20–30

15–20

肝臟

25 mg

60–115

10–30

大腦

25 mg

35–60

15–30

25 mg

25–45

5–10

心臟

25 mg

15–40

5–10

腎臟

25 mg

40–85

15–30

脾臟

10 mg

25–45

5–30


核酸未經RNase處理 。
核酸經RNase處理。總核酸的量(μg)


圖1 純化長達50 kb的基因組DNA
QIAamp Kits從圖示來源的樣本(每泳道3 μg)中純化獲得的DNA長度



RNeasy Kit —— 常規組織或細胞 RNA 純化

  1. 從細胞、組織或酵母中純化至總 RNA
  2. 數分鐘內快速純化得到高品質總 RNA
  3. 即用型 RNA 在各種下游應用中表現良好
  4. 無需有機試劑或乙醇沉淀步驟

RNeasy Kits 提供四種規格(Micro, Mini, Midi, Maxi),RNeasy 離心柱的結合能力分別為45 μg, 100 μg, 1 mg 和 6 mg 的 RNA。

表2 RNeasy Mini Kit從各類樣本中純化得到的總RNA產量

樣本來源

起始材料

平均產量(μg)

動物細胞
LMH
HeLa
COS-7
淋巴細胞(未受激)


1 x 106
1 x 106
1 x 106
1 x 106


12
15
35
0.5

小鼠組織



10 mg
10 mg
10 mg


40
10
35

真菌細胞
S. cerevisiae


1 x 107


25

圖2 從多種樣本中純化高品質RNA。


使用RNeasy Maxi Kit純化的總RNA的甲醛瓊脂糖凝膠電泳和northern印跡。從各種來源的樣本中分離總RNA(10 μg)上樣至各泳道。所有組織均來源于小鼠。酵母:Saccharomyces cerevisiae;E. coli菌株:HB101。32P標記的探針識別的(G)GAPDH;(E)翻譯延長因子EF-1α;和(O)外膜蛋白A序列。(E和O分別由瑞士巴塞爾大學的P. Philippsen和德國蒂賓根馬克斯-普朗克生物學研究所的U. Henning提供。)B. subtilis未采用探針檢測。M:0.24–9.5 kb RNA分子量標準。胚胎、Huh7和HeLa細胞泳道中的7.5 kb條帶(圖示)為核前體RNA。

表3 常規組織,細胞核酸純化產品列表:


產品名稱

貨號

QIAamp DNA Mini Kit (50)

51304

QIAamp DSP DNA Mini Kit (50)

61304

RNeasy Mini Kit (50)

74104

RNeasy Mini Kit (250)

74106

RNeasy Plus Mini Kit (50)

74134

RNeasy Plus Universal Midi Kit (10)

73442

RNeasy Midi Kit (10)

75142

RNeasy Midi Kit (50)

75144

RNeasy Maxi Kit (12)

75162

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