色网址在线-色网址在线观看-色网综合-色翁荡息又大又硬又粗视频-色翁荡息又大又硬又粗又视频软件-色翁荡息又大又硬又粗又视频图片

服務咨詢熱線:

021-66030766

TECHNICAL ARTICLES

技術文章

當前位置:首頁技術文章基因組DNA提取純化的注意事項

基因組DNA提取純化的注意事項

更新時間:2015-07-01點擊次數:1336


  1. 組織樣本 DNA 純化

大多數動物組織可以用裂解緩沖液和蛋白酶/蛋白酶 K 進行裂解。在加入裂解液之前需要將組織切成小塊,有條件的話建議使用 TissueLyser 或研缽等提前進行均質化。骨骼肌,心臟,皮膚等組織含有收縮蛋白,結締組織和膠原蛋白,所以利用蛋白酶 / 蛋白酶 K 進行充分消化是必須的。

FFPE 樣本進行 DNA 純化時需要預裂解。福爾馬林可由 PBS 洗滌除去,石蠟可由二甲苯和乙醇進行去除。在蛋白酶消化后提高孵育的溫度有助于逆轉交聯,以便更好的從 FFPE 組織中釋放 DNA,從而有助于提高 DNA 產量和改善下游檢測性能。 從 FFPE 中得到的 DNA 通常比從新鮮或凍存樣本中得到的 DNA 分子量小;DNA 降解的程度則取決于樣本類型,儲存時間和固定的條件。


  1. 從微量樣本中純化 DNA

微量樣本中 DNA 的含量很低,通常小于 5 ng DNA, 通常需要使用 carrier RNA 來提高產量(不會影響下游分析檢測)。如果需要使用 carrier RNA,那么在測量 OD 的時候會因為使用 carrier RNA 造成濃度測量有偏差(因為 RNA 在 260 nm 也有吸收)。

推薦使用 QIAamp DNA Micro Kit 從微量樣本中進行 DNA 純化,該試劑盒采用 MinElute 硅膠膜柱,洗脫體積可以低至 20 μl,同時通過兩步洗滌去除 PCR 抑制劑等污染物,zui大程度從微量樣本中純化 DNA。


  1. 從血液樣本中純化 DNA

血液樣本可以是新鮮或凍存全血或干血片,由于血液樣本在采集后會迅速凝固,所以通常在采血時使用 EDTA,檸檬酸鹽或肝素進行抗凝。經過抗凝處理的血液樣本可以直接用于 DNA 純化,需要注意的是使用的 DNA 純化方法需要能夠去除上述抗凝劑,以免干擾下游 PCR 檢測。全血也可以在 DNA 純化前*行白細胞富集等再進行 DNA 純化。

從血液中純化 DNA 的產量很大程度上取決于血液中的白細胞數量,而白細胞數量則和血液的供體情況有很大關聯(如貧血或感染都會造成白細胞數量變化)。上述情況必須在進行 DNA 純化前就應該考慮到。此外,有些動物有有核血,這意味著這類樣本中含有更多的 DNA,在從此類血樣中純化 DNA,上樣量需要減少 10 倍左右。


從細胞中純化 DNA
  1. 哺乳動物細胞可以使用蛋白酶 K 進行裂解
  2. 酵母細胞需要首先使用溶菌酶對細胞壁進行處理,然后使用蛋白酶或蛋白酶 K 進行消化
  3. 許多細菌細胞可以使用裂解 buffer 和蛋白酶 / 蛋白酶 K 進行裂解,某些細菌如革蘭氏陽性菌需要預先使用溶菌酶對細胞壁進行處理
  4. 細菌細胞需要先從生物體液中沉淀,然后從中純化細菌 DNA,拭子樣本需要先使用殺菌劑進行預處理然后再離心
  5. 使用機械裂解會比用酶消化的效果要好,尤其是針對革蘭氏陽性菌或真菌而言

尊敬的客戶:
    感謝您關注我們的產品,本公司除了有此產品介紹以外,還有三用紫外分析,核酸蛋白檢測儀,凝膠成像分析系統,光化學反應儀,恒流泵,自動部分收集器等等的介紹,您如果對我們的產品有興趣,咨詢。謝謝!

上海嘉鵬科技有限公司 www.shjpkj。。com / www.jp1718。。com
:   36162366 
400免費:4000-123-925  
 
,,,,2880150297

地址:上海市真陳路1398弄15號  :200444 


上一個:你知道蠕動泵種類有那兩種?

返回列表

下一個:RNA提取純化的注意事項

亚洲v国产v欧美v久久久久久 | 6080亚洲| 久久国产一区二区三区 | 午夜爽爽爽男女免费观看影院 | 在线播放无码高潮的视频 | 国产亚洲av综合人人澡精品 | 亚洲中久无码永久在线观看同 | 国产拍揄自揄精品视频 | 国模冰莲极品自慰人体 | 人妻无码中文字幕免费视频蜜桃 | 亚洲爆乳无码精品aaa片蜜桃 | 韩国精品福利一区二区三区 | 狠狠色噜噜狠狠狠狠色综合久 | 38pao强力打造永久免费高清视频 | 久久久久亚洲av无码尤物 | 国产在线欧美日韩精品一区二区 | 黄色片网站在线免费观看 | 天天躁日日躁狠狠很躁 | 无码专区永久免费av网站 | 国产精品欧美一区二区三区 | 黑森林福利视频导航 | 色婷婷综合久久久久中文一区二区 | 人妻被按摩师玩弄到潮喷 | 国产精品videossex久久发布 | 精品无码国产自产野外拍在线 | 久久久久久成人毛片免费看 | 少妇性饥渴无码a区免费 | 少妇伦子伦情品无吗 | 亚洲日韩av无码一区二区三区人 | 亚洲精品午夜无码电影网 | 熟妇人妻中文字幕无码老熟妇 | 国产一区二区三精品久久久无广告 | 国产女人18毛片水真多18精品 | 国产一区二区不卡视频 | 国产a级三级三级三级 | 无码国产精品久久一区免费 | 18禁黄无码免费网站高潮 | 亚洲av无码久久精品色欲 | 亚洲欧美日韩在线一区 | 国产欧美亚洲精品a | 一本大道伊人av久久综合 |