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淺談凝膠成像分析系統組成及各部件性能

更新時間:2016-05-20點擊次數:2076

凝膠成像系統的基本骨包含:CCD相機,暗室和分析軟件。不過其功能不僅于對瓊脂糠凝膠進行成像,現在的成像儀趨向于多功能化,還適用于蛋白膠、發熒光的膠、印跡膜和菌落平板等應用。
     在Western Blot方面,高性能的CCD分子成像系統能與膠片媲美。 CCD是電荷耦合器件(Charge Coupled Device)的英文名稱縮寫,是一種光電轉換器件。是凝膠圖像系統的核心部件。絕大多數對數碼相機都有一定的了解,不少人還是這方面的專家。有人把數碼相機的像素看得很重,但比較之后發現,有些400萬、500萬像素的相機拍出來的片子沒有300像素的機子拍出來的好,這是為什么?
     其實,影響凝膠成像的因素很多,衡量CCD好壞的指標,有分辨率,CCD尺寸,動態范圍,靈敏度,量子效率,信噪比等,其中像素數以及CCD尺寸是重要的指標。其實是說感光器件的面積大小,這里就包括了CCD感光器件的面積越大,也即CCD面積越大,捕獲的光子越多,感光性能越好,信噪比越低。 為了方便您更了解CCD的大小,現列舉目前市場上所應用的CCD規格如下:
    1英寸——靶面尺寸為寬12.7mm*高9.6mm,對角線16mm。
    2/3英寸——靶面尺寸為寬8.8mm*高6.6mm,對角線11mm。
    1/2英寸——靶面尺寸為寬6.4mm*高4.8mm,對角線8mm。
    1/3英寸——靶面尺寸為寬4.8mm*高3.6mm,對角線6mm。
    1/4英寸——靶面尺寸為寬3.2mm*高2.4mm,對角線4mm。
    CCD的分辨率由低到高: 從45萬左右,100萬左右,140萬左右,200萬左右,300萬左右,400萬左右,500萬左右,甚至還有更高的,根據CCD的溫度有可以分為常溫CCD相機和制冷CCD相機,制冷CCD:在相同滿井電子的CCD,降低CCD噪音,就能提高CCD的監測能力,熱或者暗電流對于CCD都是噪音,噪音在Cool CCD基本都可以被深度致冷的Peltier消除。在曝光超過5-10秒,CCD芯片就會發熱,沒有致冷設備的芯片,“熱”或者白的像素點就會遮蓋圖像,圖像到處可見雪花。CCD結構設計、數字化的方法等都會影響噪音的產生。當然通過改善凝膠成像系統結構、優化方法,同樣能減少噪音的產生。
    熒光及化學發光本身較弱,所以對CCD噪音的降低要求很高,應選用高分辨率數字冷卻CCD相機結合高通透鏡頭系統,使其能夠捕獲到信號極其微弱的熒光及化學發光樣品圖像,并且能夠zui大程度的降低噪音,減少背景,提供出色的圖像清晰度。另外可選激發光源及多位濾鏡輪擴大了熒光/化學發光成像的應用范圍。所以一般在熒光及化學發光觀察時需要選擇制冷CCD。所以制冷CCD相機是分子影像成像分析系統的未來的發展趨勢和必須要求。

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